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血液RNA常温保存/运输/提取试剂盒产品选择指南

发布时间:2018-03-28   浏览次数:

血液RNA常温保存/运输/提取试剂盒产品选择知识大全

 

一、客户需要收集保存零散送来的新鲜抗凝血样,将来统一提取RNA需要在4℃(常温)不超过1天的运输。

首选R213-50 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒,在临床上采血时,可以先把试剂盒中的裂解液RLS  (也就是浓缩型的Trizol--RNAzol LS Reagent,货号:R012-100)分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可以),然后取250ul全血样品加入到750ul的RNAzol LS Reagent中,用移液器反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液直接保存在-20℃下可达1-2个月,-80℃可达半年(推荐温度越低越好)。


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运输过程:可以冰袋4℃运输1天,干冰-80℃运输一周。


提取方法:室温解冻后,从R213-50试剂盒的第2步开始往下直接提取RNA。


注意:如果客户需要保存处理提取RNA的血液体积超过0.25ml,可以单独购买更多的裂解液RLS(RNAzol LS Reagent,货号: R012-100 ),并按照RNAzol LS Reagent的说明书提取RNA。


2.客户需要收集保存新鲜抗凝血样,并且需要在4℃(或者常温)不超过3-5天的运输(当然如果能用干冰运输肯定效果更好)。运输到目地地后-80冰箱至少可以保存半年。

这种情况有两种解决方案,一种是用R115-100 RNAsafe无液氮RNA样品保存液(同RNAlater)保存血液和配套的提取试剂盒,另一种是用PAXgene采血管保存血液和配套的提取试剂盒的方案。

而有明确文献证据证明R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater)方案RNA产量至少是PAXgene方案的一倍,RNA完整性也要更好!所以,首先推荐R115-100无液氮RNA样品储存液(RNAlater)方案。


A: R115-100 RNAsafe无液氮RNA样品储存液(同RNAlater)的方案:

运输保存:首先按照正常的采血流程获得抗凝新鲜血,充分颠倒混匀后,吸取300-500ul抗凝全血加入到1.3mlRNAsafe(RNAlater)中颠倒充分混匀,就可以开始运输了。一般建议4℃(或者常温)运输不超过3天,更长时间的运输会造成RNA产量逐渐降低,如果时间更长,建议使用干冰运输。到达目的地后,放-80,至少可以保存半年。


提取方法:保存在R115-100 RNAsafe无液氮RNA样品保存液中的血样,因为样品中含有大量的硫酸铵(RNAlater的主要成分),所以普通试剂盒无法提取,或者提取的产量很低,纯度也差,必须用特制的试剂盒提取,需要用本公司R510-50-RNAstore Blood RNA Kit进行提取(该试剂盒为本公司国内首家和独家产品)。

也可以用对应的国外试剂盒ThermoFisher的RiboPure-Blood Kit(Cat: AM1928)提取,但是国外的有3个显著缺点:1. 太昂贵。2. 国内经常没现货,货期无保障。 3.没有配套的DNA酶柱上消化,洗脱下来的RNA会残留DNA还需要进一步繁琐的步骤去除DNA。


B: PAXgene采血管(BD 762165 PAXgene Blood RNA Tube)方案:


运输保存:按照PAXgene Blood RNA tube 静脉真空采血管(全血RNA管)说明书采集血液。该系统可以收集全血、稳定核酸、纯化RNA。该采血管中添加了特殊的试剂,可以快速地保护细胞内的RNA被降解,在18~25℃可以保存3天,2~8℃可以保存5天。到达目的地后,放-80,至少保存4年。


提取方法:保存在PAXgene采血管的中血样提取,必须用特制的试剂盒提取,需要选择本公司R419-50-PAX blood RNA kit(For PAXgene blood tube),该试剂盒为本公司国内首家和独家产品。也可以用对应的国外试剂盒Qiagen的PAXgene Blood RNA Kit (Cat: 762174)提取,但是国外的有2个显著缺点1. 太昂贵。2. 国内经常没现货,供货无保障。