北京金百特生物技术有限公司

货号	产品名称	规格	价格	优惠价
V017-100（40KU）	V017 T4 DNA Ligase	100次*10ul/rxn	450元
V017-500（200KU）	V017 T4 DNA Ligase	500次*10ul/rxn	1725元

T4 DNA Ligase 是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5’-磷酸末端和3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接，修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。

（1）DNA片段和载体DNA快速连接；
（2）限制酶切片段的克隆；
（3）将DNA片段与linker或Adaptor连接。

浓度： 400 Units/ml 

一、快速连接反应体系： (以 20 μl 反应体系为例)

2 ´ Rapid Ligation Buffer	10 ml
载体DNA	10 - 100 ng
插入DNA片段	3倍于载体摩尔数
ddH2O	To 20 ml
T4   DNA ligase   (400 U /ml)	2   ml （最后加入）

反应循环的设置：25^oC ~ 30^oC反应 5 ~ 10 min。

二、普通连接反应体系： (以 10 μl 反应体系为例)

10 ´ Ligation Buffer	1 ml
载体DNA	10 - 100 ng
插入DNA片段	3倍于载体摩尔数
ddH2O	To 10 ml
T4   DNA ligase   (400 U /ml)	1   ml （最后加入）

反应循环的设置：粘端连接：22^oC反应10分钟(可根据需要延长到1小时)；也可以16^oC反应1-5小时。

 平末端连接：22^oC反应2小时或16 ^oC过夜。