| 货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|---|
| LP800-100 | LP800 全能型样本直接扩增PCR试剂盒 | 100 rxns | 410元 | 328元 |
| LP800-500 | LP800 全能型样本直接扩增PCR试剂盒 | 500 rxns | 1850元 | 1480元 |
| LP800-2000 | LP800 全能型样本直接扩增PCR试剂盒 | 2000 rxns | 6660元 | 5328元 |
无需核酸纯化步骤,直接使用动物组织、植物组织、血液、菌液、菌斑、土壤等样本直接进行PCR扩增,可实现样本PCR检测的高通量化,样本用量少,操作简单,实验成本低!适合转基因检测、基因型鉴定、DNA来源鉴定、物种鉴定、质粒检测、基因敲除分析、SNP分析等。
首先用核酸释放剂快速裂解样本(动物组织、植物组织、血液、菌液、菌斑、土壤等),释放的基因组DNA,离心,取少量裂解上清液作为模板,然后用2 × Direct PCR Mix扩增,进行PCR鉴定,一般扩增产物<2.5kb,带A尾,可直接上样电泳,简单,高效!
注意事项:
1. “核酸释放剂”的作用是为了裂解细胞,释放出DNA当模板(请先探索核酸释放剂与你的样本的比例关系:样本太多会超出核酸释放剂的处理上限,导致裂解不完全;样本太少会造成模板浓度过低,导致PCR失败)。因为核酸释放剂在特殊的情况下需要20-50ul,而标准裂解是20ul处理体系,若有需求可单独购买。
2. 沸水浴处理3-5分钟,如果实验室没有沸水浴,也可以用PCR仪98度处理3-5分钟。
3. 裂解上清液DNA放在-20度可保存4-6周。再次取出做模板时,务必12000 rpm离心1-2 min后,取上清1-2ul做PCR模板。
4. 沸水浴处理3-5分钟,如果实验室没有沸水浴,也可以用PCR仪98度处理3-5分钟。
5. 研磨小技巧:
1)将黄枪头用火灼烧融化成自制的“研磨杵”,在0.2mlPCR管中研磨幼嫩组织或者昆虫;
2)成熟叶片或较大组织,加入50-100ul裂解液在1.5ml 离心管中用研磨杵旋转挤压破壁;
3)种子或很厚样本(杨树叶片)需要先用液氮研磨,再取少数样本加入50-100ul裂解液。
操作步骤:
A. 取样切勿太多:10-20μl核酸释放剂加入1-2mm2(1-2平方毫米)大小样本为宜!
B. 用裂解上清液作为模板PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10。
1. 动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)
20μl 核酸释放剂加入2 mm2 样本,将固体样品尽量研磨,煮沸3-5 min,(鼠尾、鼠趾等富含胶质样本,冷却到室温再加入20μl氯仿,Vortex 10秒)12000 rpm离心1-2 min,取1-2µl作为后续PCR模板。
2. 植物组织样品(幼嫩叶片,果实、种子、根组织等)
20μl 核酸释放剂加入2 mm2样本,将固体样品尽量研磨,煮沸3-5 min,(棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘等多糖多酚类样本,冷却到室温再加入20μl氯仿,Vortex 10 sec),12000 rpm离心2 min,取1-2 µl作为后续PCR模板。
3. 血液或其他液体样品(尿液、组织液及各种体液)
以液体样本和裂解液体积比1:2混合(5μl样本:10 μl核酸释放剂),95 ˚C或煮沸3-5 min,12000 rpm离心1-2 min,取1-2µl作为后续PCR模板。
4. 菌液样品
将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:2混合(5μl菌液:10μl最佳伴侣),直接沸水浴3-5 min,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
5. 平板上的菌落
用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 µl最佳伴侣,吹吸混匀,95 ˚C或沸水浴3-5 min,12000 rpm离心1-2 min,取1-2µl作为后续 PCR模板。
6. 土壤等环境组织样品
20μl裂解液加入2mm2(2平方毫米)样本,将固体样品尽量研磨,95 ˚C或煮沸3-5min,12000rpm离心1-2min,取1-2µl作为后续PCR模板。