货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 优惠价 |
---|---|---|---|---|
P414-50 | P414 Script IV 1st Strand cDNA Synthesis Kit(with dsDNase) | 50次 | 1300元 | 780元 |
P414-100 | P414 Script IV 1st Strand cDNA Synthesis Kit(with dsDNase) | 100次 | 2080元 | 1248元 |
Script IV 1st Strand cDNA Synthesis Kit(With dsDNase)采用第四代高达60℃的全新高温逆转录酶,可以通读GC含量丰富,二级结构复杂的RNA模板,极大提高了逆转录效率(CT值一般提早2-3个循环)和长度(可合成长达15 kb的cDNA以及高比例的全长cDNA);可用于PCR、qPCR等下游实验。
本产品采用预混合技术和热敏性dsDNase,只需一步操作,15 min 即可同时完成基因组清除与逆转录反应,极大简化了操作步骤,避免了复杂加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。
Oligo(dT)18 和Random primer (N6)是独立组分,可以自由选用,以获得最合适的反转录结果!
引物的选择:
1. 如果RNA模板来源于真核生物,首选Oligo (dT),与真核生物mRNA的3’PolyA尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。
2. 如果对一些物种,不能确定mRNA是否有polyA尾的情况下,首选Oligo (dT),不成功再尝试基因特异性引物(GSP)和Random primer为引物。
3. 基因特异性引物(GSP)的特异性最高。但有些情况下,用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成,可改用Oligo (dT)或Random primer重新进行逆转录。
4. Random primer特异性最低,所有RNA,包括mRNA,rRNA,tRNA均可以作为Random primer的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高,或者模板为原核生物来源,使用Oligo (dT)或基因特异性引物(GSP)无法有效引导cDNA合成时,可使用Random primer为引物。
5. 如果合成cDNA下游用于qPCR,可将Oligo (dT)与Random primer混合使用(各加1μl /20μl反应体系),可使mRNA的各个区域cDNA合成效率相同,有助于提高qPCR结果的真实性和重复性。
P414是P118的升级版 采用60℃高温反转录酶,对复杂模板更友好!
与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性