货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 优惠价 |
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P118-50 | P118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (with dsDNase)★★★ | 50rxn(20μl/rxn) | 1000元 | 600元 |
P118-100 | P118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (with dsDNase)★★★ | 100rxn(20μl/rxn) | 1665元 | 999元 |
Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(With dsDNase)采用第三代高效逆转录酶,具有更强的延伸能力和稳定性,并配备了具有DNA分解活性的特殊dsDNase,只需一步操作, 即可同时完成基因组清除与逆转录反应,操作方便快捷,可用于长达12kb的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。逆转录产物可以用于PCR,克隆基因;也可以用于qPCR,兼容染料法和探针法,用来检测高拷贝或低拷贝基因。
Oligo(dT)18 和Random primer (N6)是独立组分,可以自由选用,以获得最合适的反转录结果!
引物的选择:
1. 如果RNA模板来源于真核生物,首选Oligo (dT),与真核生物mRNA的3’PolyA尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。
2. 如果对一些物种,不能确定mRNA是否有polyA尾的情况下,首选Oligo (dT),不成功再尝试基因特异性引物(GSP)和Random primer为引物。
3. 基因特异性引物(GSP)的特异性最高。但有些情况下,用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成,可改用Oligo (dT)或Random primer重新进行逆转录。
4. Random primer特异性最低,所有RNA,包括mRNA,rRNA,tRNA均可以作为Random primer的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高,或者模板为原核生物来源,使用Oligo (dT)或基因特异性引物(GSP)无法有效引导cDNA合成时,可使用Random primer为引物。
5. 如果合成cDNA下游用于qPCR,可将Oligo (dT)与Random primer混合使用(各加1μl /20μl反应体系),可使mRNA的各个区域cDNA合成效率相同,有助于提高qPCR结果的真实性和重复性。
可用于长达12kb的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。
逆转录产物可以用于PCR,克隆基因;也可以用于qPCR,兼容染料法和探针法,用来检测高拷贝或低拷贝基因。
同款:Takara的PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(cat# RR037A)