不戴口罩也能提取RNA？！
发布时间：2020-03-12 浏览次数：次
搞定RNA如探囊取物！
不用戴口罩、研钵不灭菌、粗放操作、20分钟、提取高质量RNA！
不用戴口罩、研钵不灭菌、粗放操作、20分钟、提取高质量RNA！
一说到提取RNA，好多同学感觉到头大，战战兢兢，试验顺利进行好像都是运气。
实验前准备：研钵150烘烤4小时，离心管、吸头用DEPC处理；
操作过程更是要求必须在超净台进行或者在RNA提取专区进行，离心机、移液器、试剂专用，带口罩、帽子、屏住呼吸、不说话，带乳胶手套并要时常更换。
这样做无非是听说RNase很恐怖（书本上或者网上“RNA提取注意事项”），无处不在，所以到处都要擦的bling bling才能做实验，好像空气中的RNase都能炸出汁的样子。
RNase可怕不？
对，RNase可怕，这一点不假。
RNase在哪里呢？
RNase主要来自样品的细胞。如果按比例来说的的话，细胞内源性的RNase占99.9%，实验环境的RNase占0.01%，一般可以忽略不计。
所以，研钵洗干净、烘干即可。买点无酶的吸头、离心管，找一个普通的试验台，穿好实验服戴好手套，保护好自己就好。口罩爱带不带，做实验时高冷一点，不要指点江山，唾沫横飞即可。如果做实验时必须要用到trizol（主要成分苯酚）、氯仿、B-巯基乙醇等易挥发有毒试剂时，带口罩可以保护自己哦。
RNA提取真正需要注意的要点：
你的植物组织样本采样、保存正常吗？组织裂解充分了吗？组织起始量是否过大？起始量过大的话，他们得带进去多少RNase呀，导致裂解液不能充分抑制内源性的RNase，失败就在预料之中！
你的细胞活性好吗？细胞都到衰亡期了，你提什么RNA呀；细胞加的那么多，破壁不充分，怎么裂解的好呢，他们本身得带进去多少内源性RNase污染呀！转移液体时吸到沉淀了吗？吸水相时碰到中间层了吗？乙醇干燥净了吗？
裂解样本的过程是重中之重：
液氮研磨（手工），要先加液氮预冷一下研钵，然后研磨，研磨过程要保证研钵中一直有少量液氮，研磨完成一个样本后，直接加入裂解液涡旋震荡后放常温，或者直接丢到液氮中，全部研磨后一起加裂解液。
液氮研磨（研磨仪），研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。在2ml圆底离心管（液氮研磨专用最好，液氮研磨中不破裂就好）中加入5mm钢珠一粒，放进样品，投入液氮中预冷。把所有预冷好的离心管插进研磨模块中，放进研磨机震荡20-30秒。完成后马上加裂解液，涡旋。
最后一点：RNA提取试剂盒你选对了吗？
要提mRNA就选总RNA提取试剂盒或者Trizol，要提microRNA就选microRNA提取试剂盒，不能用总RNA提取试剂盒，也不能用Trizol，因为市面上所有公司的总RNA提取试剂盒和Trizol会丢失大量microRNA。关于这个，这里不再详述，下次有机会详细讲解！
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高效、无毒、省时、省力——是金百特生物一直以来的追求！
由于新冠疫情，人们对个人健康防护愈发重视，使得免氯仿、免β-巯基乙醇的总RNA提取试剂盒更加火爆，加上gDNA过滤器的加持，省去了费时费力DNase的消化过程，让用户20分钟可以获得高纯度的RNA！
植物总RNA提取 全程用时20分钟：
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动物组织、细胞、昆虫总RNA提取 全程用时10分钟：
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R015-50-细胞microRNA和总RNA
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让天下没有难提的RNA!——北京金百特生物技术有限公司
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详见公司网站：
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北京金百特生物技术有限公司
Beijing GeneBetter Biotech Co.,Ltd.
网址：www.gene-better.cn
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