北京金百特生物技术有限公司

在多快好省的今天，把目的基因直接连到表达载体上去，无疑是最佳方案，所以无缝克隆（同源重组）试剂盒在分子生物界大火！无缝克隆是一种新型高效的基因克隆技术，它可以同时将1~5个DNA片段高效地插入到任何表达载体的任意位点，用来构建表达载体，使得目的基因在宿主中表达。

无缝克隆流程图


目前应用较广泛的无缝克隆方法是Gibson Assembly和In-Fusion Cloning。这两种方法的在原理上非常相似：都是通过外切酶产生黏性末端、然后利用体内或体外重组酶进行连接，得到重组片段；但两者用到的酶却完全不同。
 

综述：无缝克隆技术严格意义来说不是新技术，类似于乔布斯天才的集成了现成的电子元器件造出Iphone，开创了智能手机新时代一样。关于克隆技术，Daniel Gibson和J.Craig Venter在2009年提出了一个新颖的思路，将3种现有的商品化的酶（T5外切酶/Phsuion高保真聚合酶/Taq DNA ligase）组合起来，达到了无缝克隆的效果，开创了无缝克隆新时代。

理论上，Gibson Assembly原理的无缝克隆试剂盒因为采用3种酶的组合，比In-Fusion原理只采用1种同源重组酶效果要好，因为同源臂配对后产生的缺刻，Gibson原理的无缝克隆是在体外已经完成了修复，而In-Fusion需要先转入细菌体内进行缺刻的修复，这样就意味着转入大肠杆菌时，Gibson更容易转进去，更重要的是In-Fusion在细菌体内进行缺刻的修复时，可能会导致载体上会插入细菌的DNA片段（特别是在同源臂较长的时候），导致表达载体构建的失败！而一些客户反馈连接多片段时，In-Fusion效率较低，甚至经常失败，而Gibson则可以很好的胜任，表出更高的成功率！

所以金百特生物的无缝克隆采用的是Gibson Assembly原理，8年来，不断优化技术指标，性能业界领先，加上销量的逐年上升，生产成本下降，金百特将以更低的价格、更高的品质回馈长期以来支持我们的中国用户。

 

   

质控：3000bp的DNA片段插入7000bp的载体