为什么RNeasy mini kit只有2条带？Trizol有3条带？-北京金百特生物技术有限公司

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为什么RNeasy mini kit只有2条带？Trizol有3条带？

发布时间：2022-03-25 浏览次数：次

一、为什么RNeasy mini Kit只有2条带？

首先我们得知道什么是总RNA?

你们也许会说，教课上有讲到的，顾名思义，总RNA就是所有的RNA，包括：信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)、microRNA(miRNA)、小分子RNA(主要包括snRNA、scRNA)、非编码RNA(lncRNA)、cirRNA等

但是，在生产RNA试剂盒的公司眼中，总RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的总和。这个概念是在还没有发现microRNA的时候产生的，但是却被各大公司所默认，一直延续至今。

也就是说在市场上你看到的“总RNA提取试剂盒”，“RNA提取试剂盒”，进口的 RNA Kit，其中的”RNA”是指mRNA，提出来的是这三种RNA（mRNA、tRNA、rRNA）的混合物。

所以各位可以去各大公司的网站，看一看，总RNA提取试剂盒案例，所展示的RNA电泳图，只有代表“总RNA”的2条带——28s和18s；代表microRNA的5s带，要不没有，要不很弱。

这就是目前各个公司总RNA提取试剂盒中“总RNA”的概念。

RNeasy mini kit的提出的高质量RNA

GeneBetter同款Kit:

R017-50 动物组织/细胞/昆虫总RNA提取试剂盒 1200元/50次 8折

R019-50 植物总RNA提取试剂盒（免氯仿）1200元/50次 8折

科普一：mRNA在哪里吗？电泳图上能看到吗？

答案：mRNA只占总RNA的1%~5%，点样孔的总RNA低于800ng时，基本看不到，浓度较高时，变现为28S、18S中间以及上下的涂抹带。

不要觉得胶图不好看，其实这才是我们要检测的mRNA(信使RNA)，mRNA不是一个固定长度的RNA，而是由不同长度m RNA组成的，一般会大于200nt，所以市面上的RNAkit不关注位于200nt左右的5S带。

科普二：为什么说RNA电泳图有2：1的条带，我们就判定其为好的RNA呢？

答案：核糖体RNA（rRNA）占总RNA的75~85%，跑电泳时，我们看到rRNA的大片段28S、18S表现为2:1，我们通常认为RNA是完好的，没有降解的。原理是：因为长链的rRNA都没有降解，我们据此推断出：mRNA也应该是完好的。

二、为什么Trizol提出来的是3条带？

答案：Trizol是通过异丙醇沉淀得到RNA，会沉淀出大部分的小片段RNA，所以会出现5S带。

图片来源于农科院作物所，Marker左边是invitrogen的trizol；marker右边是金百特的RNAzol。都是上样3ul，由于我们的RNA浓度过高（~5000ng/UL），电泳条带都快分不开了。